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Microscopie intravitale confocale de la cornée
Dernière revue: 11.04.2020
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La microscopie confocale de la cornée est l'une des méthodes modernes d'investigation; permet de réaliser une surveillance intravitale de la cornée avec visualisation des tissus au niveau cellulaire et microstructurel.
Cette méthode, grâce à la conception originale du microscope et à sa haute résolution, permet de visualiser les tissus vivants de la cornée, de mesurer l'épaisseur de chacune de ses couches et d'évaluer le degré de perturbation morphologique.
Le but de la microscopie confocale de la cornée
Caractériser les changements morphologiques dans la cornée, résultant de diverses maladies inflammatoires et dystrophiques, ainsi que des interventions chirurgicales et les effets de la CR.
Des données morphologiques sont nécessaires pour évaluer la gravité du processus pathologique, l'efficacité du traitement et déterminer les tactiques de gestion du patient.
Indications pour la procédure
- Les maladies inflammatoires de la cornée ( kératite ).
- Maladies dystrophiques de la cornée ( kératocône, dystrophie de Fuchs, etc.).
- Syndrome de "œil sec".
- Les conditions après les interventions chirurgicales sur la cornée (par la transplantation de la cornée, les opérations kérato-réfractaires).
- Conditions associées au port de lentilles de contact.
[Technique microscopie confocale de la cornée
L'étude est réalisée sur un microscope confocal ConfoScan 4 (Nider) avec une augmentation de 500 fois. L'appareil vous permet d'examiner la cornée sur toute son épaisseur.
La taille de la zone étudiée est de 440 x 330 μm, l'épaisseur de la couche de balayage est de 5 μm. Une lentille avec une goutte de gel est amenée à la cornée pour toucher et régler de sorte que l'épaisseur de la couche de liquide d'immersion soit de 2 mm. La conception de l'appareil vous permet d'examiner la cornée dans la zone centrale et ses zones paracentrales.
Performance normale
Image morphologique normale de la cornée
L'épithélium antérieur est constitué de 5-6 couches de cellules. L'épaisseur moyenne de l'épithélium entier est d'environ 50 μm. Selon la structure morphologique, les couches suivantes sont distinguées (de l'intérieur vers l'extérieur): basale, subulée et superficielle.
- La couche interne (basale) est représentée par de petites cellules cylindriques denses sans noyau visible. Les frontières de la cellule basale sont claires et lumineuses.
- La couche intermédiaire est constituée de 2-3 couches de cellules (ailées) en forme de colonne vertébrale avec des invaginations profondes, dans lesquelles des excroissances de cellules voisines sont construites. Au microscope, les limites des cellules sont assez bien distinguées, et les noyaux peuvent ne pas être définis ou être flous.
- La couche superficielle de l'épithélium est représentée par une ou deux couches de cellules polygonales avec des limites claires et une densité homogène. Les noyaux sont généralement plus brillants que le cytoplasme, dans lequel on peut également distinguer un anneau foncé proche du noyau.
Parmi les cellules de la couche de surface distinguer entre l'obscurité et la lumière. La réflectivité accrue des cellules épithéliales indique une diminution du niveau de métabolisme chez elles et le début de leur desquamation.
La membrane Bowman est une structure transparente qui ne réfléchit pas la lumière, il est donc impossible de la visualiser lorsque la microscopie confocale est effectuée.
Le plexus nerveux subbasique est situé sous la membrane de Bowman. Normalement, les fibres nerveuses ressemblent à des bandes lumineuses qui courent en parallèle sur un fond sombre, en contact les unes avec les autres. La réflectivité (réflectivité) peut être inégale en longueur de fibre.
Le stroma de la cornée occupe 80 à 90% de l'épaisseur de la cornée et consiste en un composant cellulaire et extracellulaire. Les éléments cellulaires de base du stroma sont les kératocytes; constituent environ 5% du volume.
Un modèle microscopique typique du stroma comprend plusieurs corps ovales irréguliers brillants (noyaux de kératocytes) qui se trouvent dans l'épaisseur d'une matrice transparente gris foncé ou noire. Normalement, la visualisation des structures extracellulaires est impossible en raison de leur transparence. Le stroma peut être subdivisé conditionnellement en sous-couches: antérieures (situées directement sous la membrane de Bowman et constituant 10% de l'épaisseur du stroma), antérieures, moyennes et postérieures.
La densité moyenne des kératocytes est plus élevée dans le stroma antérieur, leur nombre diminue progressivement vers les couches postérieures. La densité des cellules du stroma antérieur est presque le double de celle des cellules du stroma postérieur (si la densité des cellules du stroma antérieur est prise à 100%, alors la densité des cellules du stroma postérieur est d'environ 53,7%). Dans le stroma antérieur, les noyaux des kératocytes ont une forme ronde en forme de haricot, et dans l'ovale postérieur et plus allongé.
Les noyaux des kératocytes peuvent différer en luminosité. La capacité différente de réfléchir la lumière dépend de leur état métabolique. Les cellules plus brillantes sont considérées comme des kératocytes activés («cellules de stress»), dont les activités visent à maintenir l'homéostasie interne de la cornée. Dans la norme et le champ de vision, il y a des cellules uniques activées.
Les fibres nerveuses dans le stroma antérieur de la cornée sont visualisées sous forme de bandes homogènes claires, formant souvent des bifurcations.
La membrane de descemet est normalement transparente et n'est pas visualisée par microscopie confocale.
L'épithélium postérieur est une monocouche de cellules plates hexagonales ou polygonales avec une surface uniformément claire sur un fond de frontières intercellulaires sombres distinctes.
Le dispositif offre la possibilité de calculer manuellement ou automatiquement la densité cellulaire, leur surface et leur coefficient de variabilité.
Les changements pathologiques dans la structure de la cornée
Le kératocône est caractérisé par des changements significatifs dans l'épithélium antérieur et le stroma de la cornée.