Test de paludisme (plasmodie du paludisme dans le sang)

Les plasmodes sont absents du frottis sanguin des personnes en bonne santé. Les plasmodes paludéens parasitent alternativement deux hôtes: le corps du moustique femelle du genre Anopheles, où se produit la reproduction sexuée (sporogonie), et le corps humain, où se produit la reproduction asexuée (schizogonie). La phase initiale de la schizogonie se produit dans les hépatocytes (schizogonie extraérythrocytaire), la phase suivante dans les érythrocytes (schizogonie érythrocytaire). En se développant dans les érythrocytes, les plasmodes se nourrissent d'hémoglobine et détruisent les érythrocytes atteints. Toutes les manifestations pathologiques du paludisme [crises de fièvre, anémie, splénomégalie, lésions du système nerveux central (SNC) dans la forme tropicale du paludisme] sont associées à la schizogonie érythrocytaire.

Il existe 4 types de plasmodes:

• P. falciparum est l'agent responsable de la fièvre tropicale, la forme la plus dangereuse de paludisme, qui nécessite un traitement urgent. Chez P. falciparum, la schizogonie érythrocytaire débute dans la circulation périphérique et se termine dans la circulation centrale, en raison de la rétention des érythrocytes affectés dans les capillaires des organes internes. Par conséquent, au début de l'infection, seuls de jeunes trophozoïtes (« anneaux ») sont présents dans les produits sanguins. Les gamétocytes, après maturation dans les capillaires des organes internes, sont détectés dans le sang périphérique entre le 10e et le 12e jour de la maladie. La détection de trophozoïtes ou de schizontes adultes, quel que soit leur âge, dans le sang périphérique indique le début d'une évolution maligne du paludisme tropical et une issue fatale imminente en l'absence de mesures d'urgence. Dans d'autres types de paludisme, la schizogonie érythrocytaire se produit entièrement dans le sang périphérique. Contrairement aux autres types de plasmodes, les gamétocytes de P. falciparum ne sont pas ronds, mais oblongs, et ont une longue durée de vie. Ils meurent en 2 à 6 semaines (contre 1 à 3 jours pour les autres types). La détection de gamétocytes de P. falciparum plusieurs jours après la guérison du patient (fin de la schizogonie érythrocytaire) sous l'action de médicaments schizonticides est donc fréquente et n'est pas considérée comme un indicateur de l'inefficacité du traitement.
• P. vivax est l’agent responsable du paludisme de trois jours.
• P. malariae - l'agent causal du paludisme quarte
• P. ovale est l'agent causal du paludisme ovale (type trois jours).

Le cycle de schizogonie érythrocytaire se répète toutes les 48 heures chez P. falciparum, P. vivax et P. ovale, et toutes les 72 heures chez P. malariae. Les crises paludéennes se développent à cette phase du cycle de schizogonie érythrocytaire où la majeure partie des érythrocytes affectés est détruite et où les individus filles des plasmodes (mérozoïtes) libérés par ceux-ci envahissent les érythrocytes intacts.

Français Les éléments suivants sont importants pour établir l'appartenance des espèces aux parasites du paludisme: la présence d'un polymorphisme des stades d'âge ou d'un stade principal, leur combinaison avec les gamétocytes; la morphologie des différents stades d'âge, leurs tailles par rapport à l'érythrocyte affecté; le caractère, la taille du noyau et du cytoplasme; l'intensité du pigment, sa forme, la taille des grains/granules; le nombre de mérozoïtes dans les schizontes matures, leur taille et leur emplacement par rapport à l'accumulation du pigment; la tendance du parasite à affecter les érythrocytes d'un certain âge (tropisme); la tendance aux lésions multiples d'érythrocytes individuels par plusieurs parasites et son intensité; la taille des érythrocytes affectés par rapport à ceux non affectés, la forme des érythrocytes affectés, la présence de granularité azurophile dans les érythrocytes affectés; la forme des gamétocytes.

Lors des crises aiguës de paludisme, on observe un certain schéma de modifications sanguines. Lors des frissons, une leucocytose neutrophile avec déplacement vers la gauche apparaît. En cas de fièvre, le nombre de leucocytes diminue légèrement. Avec l'apparition de sueurs et d'apyrexie, la monocytose augmente. Plus tard, après 2 à 4 crises, une anémie apparaît, particulièrement précoce et rapide en cas de fièvre tropicale. L'anémie est principalement de nature hémolytique et s'accompagne d'une augmentation du nombre de réticulocytes. Une poïkilocytose, une anisocytose et une polychromatophilie des érythrocytes sont retrouvées dans les frottis sanguins. En cas d'aplasie médullaire, le nombre de réticulocytes diminue. On observe parfois un tableau d'anémie pernicieuse. La VS augmente significativement en cas de paludisme.

Durant la période intercritique (apyrétique), les trophozoïtes adultes prédominent dans le sang, quelle que soit la forme de paludisme, à l'exception du paludisme tropical. Durant cette période, certains stades de plasmodes sont constamment présents dans le sang, jusqu'à la cessation complète de la schizogonie érythrocytaire. De ce fait, il n'est pas nécessaire de prélever du sang uniquement au plus fort d'une crise palustre; le test peut être effectué à tout moment. L'absence de plasmodes palustres dans les frottis sanguins et dans une goutte épaisse d'un patient atteint de paludisme témoigne uniquement de la rigueur de l'examen et de la compétence professionnelle du spécialiste du laboratoire.

Lors de l'évaluation de l'intensité de la parasitémie, le nombre total de formes asexuées et sexuées est pris en compte, à l'exception de P. falciparum. L'intensité de la parasitémie est évaluée à l'aide d'une « goutte épaisse » pour 1 µl de sang. Le nombre de parasites est compté par rapport à un certain nombre de leucocytes. Lorsque 10 parasites ou plus sont détectés pour 200 leucocytes, le comptage est arrêté. Lorsque 9 parasites ou moins sont détectés pour 200 leucocytes, le comptage est repris pour déterminer le nombre de parasites pour 500 leucocytes. Lorsque des parasites isolés sont détectés dans une « goutte épaisse » de sang, leur nombre est compté pour 1 000 leucocytes. Le nombre de parasites dans 1 µl de sang est déterminé à l'aide de la formule suivante: X = A × (B / C), où: X est le nombre de parasites dans 1 µl de sang; A est le nombre de parasites comptés; B est le nombre de leucocytes dans 1 μl de sang; C - le nombre de leucocytes comptés.

Dans les cas où il n'est pas possible de déterminer le nombre de leucocytes chez un patient donné, leur nombre dans 1 µl, selon les recommandations de l'OMS, est conventionnellement pris égal à 8 000.

L'efficacité du traitement est contrôlée par l'examen d'une goutte de sang épaisse avec numération parasitaire dans 1 μl de sang. Le test doit être effectué quotidiennement du 1er au 7e jour suivant le début de la chimiothérapie. Si les parasites disparaissent pendant cette période, des analyses sanguines complémentaires sont réalisées les 14e, 21e et 28e jours suivant le début du traitement. En cas de détection d'une résistance (évaluée par le niveau de parasitémie) et, par conséquent, d'inefficacité du traitement, l'antipaludéen est remplacé par un médicament spécifique d'un autre groupe et l'analyse sanguine est réalisée selon le même schéma.

Les patients ayant contracté un paludisme tropical sont placés en observation au dispensaire pendant 1 à 2 mois, avec des analyses sanguines parasitologiques effectuées toutes les 1 à 2 semaines. Les patients ayant contracté un paludisme à P. vivax, P. ovale et P. malariae doivent être suivis pendant 2 ans. Toute augmentation de la température corporelle chez ces personnes nécessite des analyses sanguines de laboratoire pour détecter les plasmodes paludéens.

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