Analyse microscopique des expectorations

L'observation au microscope des échantillons de crachats colorés indigènes fixes et permet un examen détaillé de sa structure cellulaire, et dans une certaine mesure reflète la nature du processus pathologique dans les poumons et les bronches, son activité, afin d'identifier les différentes formation fibreuse et cristalline, ont également une valeur diagnostique importante, et enfin d'évaluer à peu près la condition flore microbienne des voies respiratoires (bactérioscopie).

À la microscopie utilisent les préparations natives et peintes de l'expectoration. Pour étudier la flore microbienne (frottis) frottis sont généralement colorés avec Romanovsky-Giemsa, Gram, et pour la détection de la tuberculose Mycobacterium mais Ziehl-Nielsen.

Eléments cellulaires et fibres élastiques

Parmi les éléments cellulaires qui peuvent être détectés dans l'expectoration des patients atteints de pneumonie, les cellules épithéliales, les macrophages alvéolaires, les leucocytes et les érythrocytes sont d'importance diagnostique.

Cellules épithéliales. épithélium malpighien n'a pas de la bouche, du nasopharynx, les cordes vocales et la valeur diagnostique de l' épiglotte, même si la détection d'un grand nombre de cellules squameuses, indique généralement un échantillon de crachat de faible qualité livrés au laboratoire et de la salive contenant des impuretés importantes.

Chez les patients atteints de pneumonie, les expectorations sont considérées comme appropriées pour une investigation si, avec une microscopie avec une petite augmentation, le nombre de cellules épithéliales ne dépasse pas 10 dans le champ de vision. Un plus grand nombre de cellules épithéliales indique une prédominance inacceptable des contenus oropharyngés dans l'échantillon biologique.

Les macrophages alvéolaires, qui en petites quantités peuvent également être trouvés dans n'importe quel crachat, sont de grandes cellules d'origine réticulohystocytaire avec un grand noyau excentré et des inclusions abondantes dans le cytoplasme. Ces inclusions peuvent être constituées de minuscules particules de poussière absorbées par les macrophages (cellules de poussière), de leucocytes et similaires. Le nombre de macrophages alvéolaires augmente avec les processus inflammatoires dans le parenchyme pulmonaire et les voies aériennes, y compris la pneumonie.

Les cellules cylindriques épithélium cilié qui tapisse la muqueuse du larynx, de la trachée et des bronches. Ils ressemblent à des cellules allongées, élargies à une extrémité, où se trouvent le noyau et les cils. Les cellules épithélium cilié cylindrique se trouve dans aucun des crachats, mais leur augmentation indique la muqueuse bronchique de dommages et de la trachée (la bronchite aiguë et chronique, la bronchiectasie, la trachéite, laryngite).

Les leucocytes en petites quantités (2-5 dans le champ de vision) sont trouvés dans n'importe quelle expectoration. En cas d'inflammation du tissu pulmonaire ou de la muqueuse bronchique et de la trachée, notamment en cas de suppuration (gangrène, abcès pulmonaire, bronchectasie), leur nombre augmente significativement.

Lors de la coloration des préparations d'expectorations selon Romanovsky-Giemsa, il est possible de différencier les leucocytes individuels, ce qui a parfois une valeur diagnostique importante. Ainsi, avec une inflammation prononcée du tissu pulmonaire ou de la muqueuse bronchique, à la fois le nombre total de leucocytes neutrophiles et le nombre de leurs formes dégénératives avec la fragmentation des noyaux et la destruction du cytoplasme augmentent.

Une augmentation du nombre de formes dégénératives des leucocytes est le signe le plus important de l'activité du processus inflammatoire et de l'évolution plus sévère de la maladie.

Les érythrocytes. Les érythrocytes simples peuvent être détectés pratiquement et n'importe quel crachat. Une augmentation significative est observée lorsque la perméabilité vasculaire est altérée chez les patients atteints de pneumonie, avec destruction du tissu pulmonaire ou bronchique, stagnation dans un petit cercle de circulation, infarctus pulmonaire, etc. Dans un grand nombre de globules rouges dans les expectorations sont trouvés au cours de l'hémoptysie de toute genèse.

Les fibres élastiques. Un autre élément des fibres de plastique expectorées qui apparaissent dans les expectorations lors de la destruction du tissu pulmonaire (abcès du poumon, tuberculose, cancer du poumon désintégrant, etc.) devrait également être mentionné. Les fibres élastiques sont présentées dans les expectorations sous la forme de fines filaments frisés à deux contours avec une division dichotomique aux extrémités. L'apparition de fibres élastiques dans les expectorations chez les patients atteints de pneumonie grave indique la survenue de l'une des complications de la maladie - abcès du tissu pulmonaire. Dans certains cas, dans la formation d'abcès pulmonaires, les fibres élastiques dans les expectorations peuvent être détectées même légèrement plus tôt que les changements radiographiques correspondants.

Souvent, avec la pneumonie croupeuse, la tuberculose, l'actinomycose, la bronchite fibrineuse dans les préparations d'expectorations, des fibres de fibrine minces peuvent être détectées.

Les signes d'un processus inflammatoire actif dans les poumons sont:

1. la nature de l'expectoration (mucopurulente ou purulente);
2. une augmentation du nombre de neutrophiles dans les expectorations, y compris leurs formes dégénératives;
3. une augmentation du nombre de macrophages alvéolaires (à partir de groupes uniques de plusieurs cellules dans le champ de vision et plus);

L'apparition dans les expectorations de fibres élastiques indique la destruction du tissu pulmonaire et la formation d'abcès pulmonaires.

Les conclusions finales sur la présence et le degré d'activité de l'inflammation et la destruction du tissu pulmonaire ne sont formées que lorsqu'elles sont comparées au tableau clinique de la maladie et aux résultats d'autres méthodes d'investigation en laboratoire et instrumentales.

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Flore microbienne

La microscopie des frottis, colorée selon Gram, et l'étude de la flore microbienne (bactérioscopie) chez une partie des patients atteints de pneumonie permettent provisoirement d'établir l'agent causal le plus probable de l'infection pulmonaire. Cette méthode simple de diagnostic rapide de l'agent pathogène n'est pas assez précise et ne devrait être utilisée qu'en combinaison avec d'autres méthodes (microbiologiques, immunologiques) d'examen des expectorations. La microscopie en immersion de frottis colorés est parfois très utile pour la sélection d'urgence et l'administration d'une antibiothérapie adéquate. Cependant, il faut garder à l'esprit la possibilité de contamination du contenu bronchique de la microflore des voies respiratoires supérieures et de la cavité buccale, en particulier lorsque la collecte des expectorations est incorrecte.

Par conséquent, les expectorations sont considérées comme pouvant faire l'objet d'un examen plus poussé (bactérioscopie et examen microbiologique) seulement si elles satisfont aux conditions suivantes:

• La coloration de Gram dans les expectorations révèle un grand nombre de neutrophiles (plus de 25 dans le champ de vision avec un petit grossissement du microscope);
• Le nombre de cellules épithéliales, plus caractéristique du contenu de l'oropharynx, ne dépasse pas 10;
• dans la préparation, il y a prédominance de microorganismes du même type morphologique.

Sur la coloration de Gram des crachats dans un frottis parfois être assez bon pour identifier gramme pneumocoque, streptocoque, staphylocoque et le groupe de bactéries Gram négatif -. Klebsiellu, baguette Pfeiffer, E. Coli et d'autres bactéries Gram-positives Dans ce cas, devenir bleu et Gram - rouge.

Pathogènes bactériens de la pneumonie

Gram positif	Gram négatif
Pneumococcus Streptococcus pneumoniae. Streptokokki Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans. Stafilokokki: Staphylococcus aureus, Staphylococcus haemolyticus.	Klebsiellы  (Klebsiella pneumoniae) Hemophilus influenzae (Pfeiffer) Haemophilius influenzae Pseudomonas aeruginosa  (Pseudomonas aeruginosa) Legionnella (Legionella Pneumophilia) E. Coli (Escherichia coli)

Frottis pré crachats est la meilleure façon de pneumonie vérification des agents pathogènes et a une valeur définie pour la sélection de la thérapie antibiotique optimale. Par exemple, lors de la détection des frottis colorés par Gram, grompolozhitelnyh diplocoques (pneumocoques) ou des staphylocoques à la place des antibiotiques à large spectre, ce qui augmente le risque de sélection et la propagation des micro-organismes aitibiotikorezistentnyh possible d'affecter la thérapie ciblée, actif contre les staphylocoques, les pneumocoques ou. Dans d'autres cas, la détection de la flore dominante dans les frottis Gram peut indiquer que pas provoque une pneumonie entérobactéries sont Gram négatif (Klebsiella, E. Coli, etc.), ce qui nécessite une thérapie ciblée de destination correspondant.

Cependant, la conclusion provisoire de l'agent causal probable de l' infection pulmonaire par microscopie peut se faire que sur la base pas augmentation significative des bactéries dans les crachats, dans une concentration de 10 ⁶ - 10 ⁷  cellules microbiennes / ml ou plus (LL Vishnjakova). De faibles concentrations de micro-organismes (<10 ³  m / s) sont caractéristiques de la microflore d'accompagnement. Si la concentration des corps microbiens varie de 10 ⁴  à 10 ⁶  m.ks / ml, cela n'exclut pas le rôle étiologique de ce micro-organisme dans la survenue d'une infection pulmonaire, mais ne le prouve pas.

Il faut également se rappeler que les pathogènes intracellulaires «atypiques» (mycoplasmes,  légionelles, chlamydia, rickettsies) ne colorent pas Gramm. Dans ces cas, la suspicion d'avoir une infection «atypique» peut survenir si les frottis montrent une dissociation entre un grand nombre de neutrophiles et un très petit nombre de cellules microbiennes.

Malheureusement, la méthode de bactérioscopie est généralement assez faible en sensibilité et en spécificité. La valeur non prédictive, même pour les pneumocoques bien visualisés, atteint à peine 50%. Cela signifie que dans la moitié des cas, la méthode donne des résultats faussement positifs. Cela est dû à plusieurs raisons, dont l'une est le fait qu'environ un tiers des patients avant l'hospitalisation ont reçu des antibiotiques, ce qui réduit considérablement l'efficacité des frottis de crachats. En outre, même dans le cas des résultats positifs de l'étude, ce qui indique une concentration suffisamment élevée dans le frottis pathogènes bactériens « typiques » (par exemple le pneumocoque), ne peut pas exclure complètement la présence de co-infection « atypiques » pathogènes intracellulaires (Mycoplasma, Chlamydia, Legionella).

La méthode de bactérioscopie des frottis d'expectoration, colorée par Gram, permet dans certains cas de vérifier l'agent causal de la pneumonie, bien qu'elle ait généralement une valeur prédictive très faible. Les agents pathogènes intracellulaires atypiques (mycoplasmes, légionelles, chlamydia, rickettsies) ne sont pas du tout vérifiés par la méthode de bactérioscopie, puisqu'ils ne colorent pas Gramm.

Il convient de mentionner la possibilité d'un diagnostic microscopique chez les patients présentant une pneumonie d'infection pulmonaire fongique. Les plus pertinentes pour les patients recevant un traitement prolongé avec des antibiotiques à large spectre, est la détection de la microscopie native ou de Candida albicans de crachat coloré sous la forme de cellules de levure et de ramification du mycélium. Ils indiquent un changement dans la microflore du contenu trachéo-bronchique, qui se produit sous l'influence du traitement antibiotique, ce qui nécessite une correction substantielle de la thérapie.

Dans certains cas, chez les patients atteints de pneumonie, il est nécessaire de différencier la maladie pulmonaire existante de la tuberculose. A cet effet, utiliser une couleur frottis Ziehl-Nielsen, qui, dans certains cas, permet l'identification de Mycobacterium tuberculosis, mais un résultat négatif d'une telle enquête ne signifie pas l'absence de patients tuberculeux. Lors de la coloration des expectorations selon Tsiol-Nielsen, mycobacterium tuberculosis est coloré en rouge et tous les autres éléments de l'expectoration sont bleus. Les mycobactéries tuberculeuses ont l'apparence de fèces, des bâtonnets droits ou légèrement courbés de différentes longueurs avec des épaississements séparés. Ils sont situés dans la préparation en groupes ou individuellement. La valeur diagnostique est la détection dans la préparation même de la tuberculose mycobactérienne unique.

Pour augmenter l'efficacité de la détection microscopique de la tuberculose mycobactérienne, utilisez un certain nombre de méthodes supplémentaires. Le plus commun d'entre eux est la méthode dite de flottation, dans laquelle les expectorations homogénéisées sont secouées avec du toluène, du xylène ou de l'essence, dont les gouttelettes apparaissent et capturent les mycobactéries. Après la décantation, la couche supérieure est pipetée sur la lame. Ensuite, le médicament est fixé et taché par Tsilyu-Nielsen. Il existe d'autres méthodes d'accumulation (électrophorèse) et de microscopie des bactéries de la tuberculose (microscopie à luminescence).

L'examen microscopique (analyse) du mucus permet de détecter le mucus, les éléments cellulaires, les formations fibreuses et cristallines, les champignons, les bactéries et les parasites.

Cellules

• Les macrophages alvéolaires sont des cellules d'origine réticulogistocytaire. Un grand nombre de macrophages dans les expectorations est détecté dans les processus chroniques et au stade de la résolution des processus aigus dans le système bronchopulmonaire. Les macrophages alvéolaires contenant de l'hémosidérine («cellules de malformations cardiaques») sont détectés avec un léger infarctus, une hémorragie, une stagnation dans un petit cercle de circulation sanguine. Les macrophages avec des gouttelettes lipidiques sont un signe de processus obstructif dans les bronches et les bronchioles.
• Les cellules Xantom (macrophages gras) se retrouvent dans l'abcès, l'actinomycose, l'échinococcose des poumons.
• Les cellules de l'épithélium cilié cylindrique sont des cellules de la membrane muqueuse du larynx, de la trachée et des bronches; ils se trouvent dans la bronchite, la trachéite, l'asthme bronchique, les néoplasmes malins des poumons.
• L'épithélium plat est détecté lorsque des crachats pénètrent dans les expectorations, sans signification diagnostique.
• Les leucocytes d'une quantité ou d'une autre sont présents dans tous les expectorations. Un grand nombre de neutrophiles sont détectés dans les expectorations mucopurulentes et purulentes. Les éosinophiles sont riches en expectorations dans l'asthme bronchique, la pneumonie à éosinophiles, les lésions pulmonaires de la glotte et l'infarctus pulmonaire. Les éosinophiles peuvent apparaître dans les expectorations pour la tuberculose et le cancer du poumon. On trouve des lymphocytes en grand nombre dans la coqueluche et, plus rarement, dans la tuberculose.
• Les érythrocytes. La détection des globules rouges dans les expectorations n'a pas de signification diagnostique. En présence du sang frais dans les crachats déterminé erythrocytes non modifiées, si le sang se déplace crachats, situés dans les voies respiratoires pendant une longue période, de détecter les érythrocytes lessivés.
• Les cellules des tumeurs malignes se trouvent dans les néoplasmes malins.

Fibres

• Des fibres élastiques apparaissent dans la désintégration du tissu pulmonaire, ce qui s'accompagne de la destruction de la couche épithéliale et de la libération de fibres élastiques; on les trouve dans la tuberculose, les abcès, l'échinococcose, les néoplasmes dans les poumons.
• Les fibres coronales sont détectées dans les maladies pulmonaires chroniques, telles que la tuberculose caverneuse.
• Les fibres élastiques calcinées sont des fibres élastiques imprégnées de sels de calcium. Leur détection dans les expectorations est caractéristique de la dégradation de la petrichite tuberculeuse.

Spirales, cristaux

• Les spirales de Kurshman se forment dans l'état spastique des bronches et la présence de mucus dans celles-ci. Au cours d'une poussée de toux, le mucus visqueux est libéré dans la lumière d'une plus grande bronche, se tordant en spirale. Les spirales de Kurshman apparaissent avec l'asthme bronchique, la bronchite, les tumeurs de poumon, comprimant les bronches.
• Les cristaux de Charcot-Leiden sont les produits de la désintégration des éosinophiles. Apparaissent habituellement dans un expectoration contenant des éosinophiles; sont caractéristiques de l'asthme bronchique, des conditions allergiques, des infiltrats éosinophiles dans les poumons, des douves pulmonaires.
• Les cristaux de cholestérol apparaissent avec un abcès, une échinococcose pulmonaire, des néoplasmes dans les poumons.
• Les cristaux d'hématoidine sont caractéristiques des abcès et de la gangrène du poumon.
• Druses d'actinomycètes sont détectés dans l'actinomycose des poumons.
• Les éléments de l'échinocoque apparaissent avec l'échinococcose des poumons.
• Bouchons Dietrich - morceaux d'une couleur gris jaunâtre, ayant une odeur désagréable. Ils sont constitués de détritus, de bactéries, d'acides gras, de gouttelettes de graisse. Ils sont typiques d'un abcès du poumon et des bronchectasies.
• La tétrade d'Ehrlich se compose de quatre éléments: des détritus calcifiés, des fibres élastiques calcifiées, des cristaux de cholestérol et des mycobactéries tuberculeuses. Apparaît dans la désintégration du foyer tuberculeux primaire calcifié.

Le mycélium et les cellules fongiques en herbe apparaissent dans les lésions fongiques du système bronchopulmonaire.

Pneumocystis se produit avec une pneumonie à pneumocystis.

Des sphérules de champignons sont détectées dans la coccidioïdomycose des poumons.

Les larves d'ascarides sont détectées avec l'ascaridiase.

Les larves de l'ugristique intestinal sont identifiées à la strongyloïdose.

Les oeufs de la douve pulmonaire sont identifiés avec la paragonimose.

Éléments trouvés dans les expectorations dans l'asthme bronchique. Lorsque l'asthme bronchique est habituellement séparé par une petite quantité d'expectorations muqueuses et visqueuses. Macroscopiquement, vous pouvez voir la spirale de Kurshman. Lorsque la recherche microscopique est caractéristique de la présence d'éosinophiles, l'épithélium cylindrique, il y a des cristaux de Charcot-Leiden.