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Analyse bactérioscopique des expectorations
Dernière revue: 04.07.2025
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L'identification rapide de l'agent infectieux est essentielle au choix judicieux du médicament antibactérien, afin de prévenir le développement de résistances bactériennes lors d'une prescription empirique d'antibiotiques. La coloration de Gram est la méthode la plus courante pour colorer tous les types de matériel prélevé chez un patient (expectorations, lavage broncho-alvéolaire, etc.) et permettre une identification rapide et précise de l'agent infectieux.
Une évaluation préliminaire d'un agent étiologique potentiel est réalisée par bactérioscopie d'un frottis d'expectoration coloré au Gram. Un frottis d'expectoration coloré au Gram est examiné avant son inoculation sur milieu nutritif afin d'évaluer son aptitude à la culture et d'identifier le pathogène probable. Un frottis est considéré comme apte à la culture si plus de 25 leucocytes et moins de 10 cellules épithéliales sont présents dans le frottis coloré au Gram à faible grossissement au microscope. Les signes d'un échantillon d'expectoration de haute qualité utilisable pour la culture comprennent une prédominance de leucocytes sur les cellules épithéliales, ainsi que la présence de bactéries d'une même espèce, localisées à l'intérieur ou autour des leucocytes. Les bactéries Gram positives dans la préparation sont bleu foncé et les bactéries Gram négatives sont roses. Les agents responsables de la pneumonie atypique (mycoplasmes, légionelles, rickettsies et chlamydia) ne sont pas colorés par Gram, c'est pourquoi les méthodes sérologiques sont principalement utilisées pour les détecter.
La coloration des frottis d'expectorations selon la méthode de Ziehl-Neelsen est utilisée pour identifier les bacilles acido-résistants, principalement les mycobactéries de la tuberculose. La préparation est préparée à partir de particules purulentes d'expectorations, sélectionnées en 4 à 6 endroits différents. Les particules sélectionnées sont soigneusement broyées entre deux lames de verre jusqu'à obtention d'une masse homogène, séchées à l'air libre et fixées au-dessus d'une flamme de brûleur. Les mycobactéries de la tuberculose sont colorées en rouge, tandis que tous les autres éléments des expectorations et les bactéries sont colorés en bleu. Les mycobactéries de la tuberculose se présentent sous la forme de bâtonnets fins, légèrement incurvés, de longueur variable, présentant des épaississements aux extrémités ou au milieu, groupés ou isolés. La détection des mycobactéries de la tuberculose est le signe le plus fiable de la tuberculose pulmonaire. La méthode de coloration de Ziehl-Neelsen pour les formes actives de tuberculose pulmonaire présente une sensibilité de 50 % et une spécificité de 80 à 85 %.
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