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Transfert de Southern
Dernière revue: 05.07.2025
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Le transfert de Southern (mis au point par E. Southern et R. Davis en 1975) est la principale méthode actuellement utilisée pour identifier les gènes d'une maladie particulière. Pour ce faire, l'ADN est extrait des cellules du patient et traité par une ou plusieurs endonucléases de restriction. Les fragments obtenus sont soumis à une électrophorèse, ce qui permet de les séparer par taille (les fragments plus petits traversent plus rapidement les pores du gel). Les fragments sont ensuite transférés (réimprimés) sur un filtre de nitrocellulose, sur lequel est déposée une sonde radioactivement marquée. La sonde se lie uniquement à la séquence complémentaire. Ensuite, par autoradiographie, la position du fragment d'ADN génomique souhaité sur l'électrophorégramme est déterminée.
L'hybridation avec une sonde d'ADN marquée de préparations d'ADN ou d'ARN appliquées goutte à goutte sur une matrice solide sans restriction préalable et électrophorèse est appelée hybridation par points ou par fentes, selon la configuration de la tache d'ADN sur le filtre (ronde ou oblongue, respectivement).
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