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Santé

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Sauzern-blotting

 
, Rédacteur médical
Dernière revue: 19.11.2021
 
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Le transfert de Southern (développé par E. Southern et R. Davies en 1975) est la méthode principale par laquelle les gènes d'une maladie particulière sont identifiés. Pour cela, l'ADN provenant des cellules du patient est extrait et traité avec l'une des endonucléases de restriction (ou plusieurs). Les fragments résultants sont soumis à une électrophorèse, ce qui leur permet d'être dimensionnés en taille (les plus petits fragments se déplacent plus rapidement à travers les pores du gel). Ensuite, les fragments sont transférés (réimprimés) sur un filtre de nitrocellulose, sur lequel est déposée la sonde radiomarquée. La sonde se lie uniquement à la séquence complémentaire. Ensuite, par la méthode d'autoradiographie, la position du fragment désiré d'ADN génomique sur l'électrophorégramme est déterminée.

L'hybridation avec les préparations d'ARN de la sonde d'ADN marquée ou d'ADN, goutte à goutte infligé à la matrice solide sans restriction avant et l'électrophorèse est appelé Dot et l'hybridation de la fente en fonction de la configuration des taches d'ADN sur le filtre (rond ou allongé, respectivement).

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