microscopie confocale

La microscopie confocale est maintenant considérée comme l'une des méthodes les plus prometteuses de l'imagerie cutanée in vivo et, par conséquent, l'intérêt qu'elle suscite parmi les cliniciens et parmi les représentants des instituts de recherche scientifique est exceptionnellement élevé.

[1], [2], [3], [4]

Capacités de microscopie confocale

En dermatologie, la microscopie confocale au laser est utilisée pour:

• étudier la pénétration des composés dans la peau (voies de pénétration, cinétique, distribution dans la peau);
• observation des glandes (définition de l'état actif et passif);
• études du lit microcirculatoire (y compris en temps réel);
• diagnostic des néoplasmes.

Sans discuter les mérites et les démérites des variétés de microscopie confocale ci-dessus, nous notons que ces dernières années, la microscopie confocale à fluorescence laser a gagné en popularité.

[5], [6], [7],

Microscopie confocale pour l'examen de la peau

Le microscope confocal fournit deux opportunités inestimables - l'étude des tissus au niveau cellulaire dans l'état de la vie physiologique et la démonstration des résultats de l'étude (activité cellulaire) en quatre dimensions - hauteur, largeur, profondeur et temps. Pour la qualité de l'image et la profondeur de l'étude, le rôle le plus important est joué par la capacité du tissu à transmettre la lumière, en d'autres termes, sa transparence. La méthode de microscopie confocale est sans contact, le rayon de lumière ne cause aucun mal ou inconfort au patient ou à l'animal expérimental.

Pour étudier la peau, la microscopie confocale à balayage laser (CSLM) est utilisée. La méthode vous permet de voir l'épiderme et la couche de derme papillaire avec une résolution proche de l'histologique. Tous les résultats de l'enquête sont affichés sur le moniteur et enregistrés sous la forme d'un ensemble de fichiers d'images (sous la forme d'un microfilm (en dynamique) ou de microphotographies).

Il y a deux types de méthode:

• Réfléchissant (CSLM de réflectance) - est basé sur le fait que diverses structures intracellulaires et intercellulaires ont différents index de réfraction de la lumière, qui permet d'obtenir une image de contraste.
• Fluorescent (CSLM de fluorescence) - utilise une lumière laser pénètre dans la peau et de stimuler ou exo endohromofory qui ont répondu commencent à émettre des photons (ie .. Fluorescence).

La résolution latérale est la distance minimale entre des points situés sur le plan horizontal, c.-à-d. Un plan parallèle à la surface de la peau. La résolution axiale est la distance minimale entre les points situés sur un plan perpendiculaire à la surface de la peau.

[8], [9], [10], [11], [12], [13], [14], [15]

L'histoire de la microscopie confocale

L'idée de créer un microscope capable au niveau cellulaire de montrer une coupe intravitale de tissu vivant a été développée il y a 130 ans. L'élément principal des microscopes modernes a été conçu à la fin du XIXe siècle et était un disque tournant avec les plus petits trous en spirale. Ce disque a été inventé en 1883 par un étudiant allemand Paul Nipkov, en l'honneur duquel il a reçu son nom - le disque de Nipkov (ou disque de Nipkov). L'invention était basée sur la capacité de la lumière à traverser les plus petits trous dans le disque et la lentille grossissante à pénétrer dans la profondeur du tissu et à éclairer le fragment de cellule à distance de la surface. Lorsque le disque tourne rapidement, les fragments sont ajoutés à l'image globale. En enlevant ou en rapprochant la structure de l'objet, on peut faire varier la profondeur de la section optique du tissu examiné.

Seulement avec l'avènement des magnétoscopes dans les années 1980 et des ordinateurs capables de traiter les images, au début des années 1990, il y avait une réelle opportunité de créer et d'appliquer efficacement les microscopes modernes qui sont utilisés à notre époque.