Microscopie confocale

La microscopie confocale est actuellement considérée comme l’une des méthodes les plus prometteuses pour l’imagerie cutanée in vivo, c’est pourquoi l’intérêt qu’elle suscite est exceptionnellement élevé parmi les cliniciens et les représentants des instituts de recherche.

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Capacités de microscopie confocale

En dermatologie, la microscopie confocale laser est utilisée pour:

• étude de la pénétration des composés dans la peau (voies de pénétration, cinétique, répartition dans la peau);
• observation du fonctionnement des glandes (détermination de l'état actif et passif);
• études du lit microcirculatoire (y compris en temps réel);
• diagnostic des néoplasmes.

Sans discuter des avantages et des inconvénients des types de microscopie confocale mentionnés ci-dessus, nous notons que ces dernières années, la microscopie confocale à laser à fluorescence est devenue de plus en plus populaire.

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Microscopie confocale pour l'examen de la peau

Le microscope confocal offre deux possibilités inestimables: l'étude des tissus au niveau cellulaire en état d'activité vitale physiologique et la démonstration des résultats de l'étude (c'est-à-dire de l'activité cellulaire) en quatre dimensions: hauteur, largeur, profondeur et temps. La capacité du tissu à transmettre la lumière, autrement dit sa transparence, joue un rôle primordial dans la qualité de l'image et la profondeur de l'étude. La microscopie confocale est une méthode sans contact; le faisceau lumineux ne cause aucun dommage ni gêne au patient examiné ni à l'animal de laboratoire.

La microscopie confocale à balayage laser (CSLM) est utilisée pour examiner la peau. Cette méthode permet d'observer l'épiderme et la couche papillaire du derme avec une résolution proche de l'histologie. Tous les résultats de l'examen sont affichés à l'écran et enregistrés sous forme de fichiers images (microfilm (en dynamique) ou microphotographies).

Il existe deux types de méthode:

• réfléchissant (réflectance CSLM) - basé sur le fait que diverses structures intracellulaires et intercellulaires ont des indices de réfraction de la lumière différents, ce qui permet d'obtenir une image de contraste.
• fluorescence (fluorescence CSLM) - utilise une lumière laser qui pénètre la peau et excite les exo- ou endochromophores qui, en réponse, commencent à émettre des photons (c'est-à-dire à fluorescer).

La résolution latérale est la distance minimale entre des points situés sur un plan horizontal, c'est-à-dire un plan parallèle à la surface de la peau. La résolution axiale est la distance minimale entre des points situés sur un plan perpendiculaire à la surface de la peau.

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Histoire de la microscopie confocale

L'idée de créer un microscope capable d'observer une section de tissu vivant à l'échelle cellulaire a été activement développée il y a 130 ans. L'élément principal des microscopes modernes, conçu à la fin du XIXe siècle, était un disque rotatif percé de minuscules trous disposés en spirale. Ce disque a été inventé en 1883 par un étudiant allemand, Paul Nipkow, qui lui a donné son nom: le disque de Nipkow. L'invention reposait sur la capacité de la lumière, traversant de minuscules trous dans le disque et une loupe, à pénétrer profondément dans le tissu et à éclairer un fragment de cellule éloigné de la surface. Lorsque le disque tourne rapidement, les fragments forment une image unique. En éloignant ou en rapprochant la structure de l'objet, il est possible de faire varier la profondeur de la section optique du tissu étudié.

Ce n’est qu’avec l’avènement des magnétoscopes dans les années 1980 et des ordinateurs capables de traiter des images au début des années 1990 qu’il est devenu possible de créer et d’utiliser efficacement les microscopes modernes que nous utilisons aujourd’hui.