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Hybridation in situ
Dernière revue: 23.04.2024
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La procédure d'hybridation peut être réalisée non seulement sur le gel, sur des filtres ou en solution, mais également sur des préparations histologiques ou chromosomiques. Cette méthode est appelée hybridation in situ. Une variante de la méthode dans laquelle des préparations d'ADN ou d'ARN marquées avec des fluorochromes sont utilisées comme sondes est appelée FISH (fluorescéine in situ hybradization). La sonde d'ADN marquée est appliquée à des préparations de chromosomes en métaphase d'hybridation (dénaturés) différemment colorés et préparés. Le prétraitement des chromosomes est utilisé pour faciliter l'accès de la sonde à l'ADN génomique. Après lavage des molécules d'ADN non lié et l' application d' une émulsion photosensible ( à l' aide d' un marqueur radioactif) ou du traitement correspondant ( en utilisant des sondes d'ADN biotine ou marqués à la fluorescéine) localisation de séquences d' ADN complémentaire de la sonde d'ADN utilisée, peut se déterminer à quel moment la microscopie la forme des points caractéristiques sur les parties correspondantes de certains chromosomes.
Cette méthode d'investigation permet de déterminer non seulement l'accessoire chromosomique, mais également la localisation intrachromosomique du gène étudié.
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