Virus de l'hépatite B

L'hépatite B est une maladie infectieuse d'une personne caractérisée par une atteinte sélective du foie par un virus. Cette forme d'hépatite est la plus dangereuse dans ses conséquences parmi toutes les formes connues d'hépatite virale. Son agent causal est le virus de l'hépatite B (VHB).

Antigène premier du virus de l'hépatite B a été détecté B. Blumberg en 1964 dans Aborigène australien sérum, et l'agent pathogène a été trouvé en 1970, D. Dane (et al.), et a reçu le nom de particules de Dane, parce qu'il n'y avait pas de certitude que , que c'est vraiment un virus, pas ses composants. Par la suite, tous les doutes ont disparu, puisque dans les particules de Dane, l'ADN génomique et une ADN polymérase ADN-dépendante virale ont été trouvés. Le virion contient trois antigènes principaux, pour lesquels les désignations suivantes ont été introduites en 1974:

• HBsAg est un antigène superficiel ou soluble ou australien.
• HBcAg est un antigène central (co-antigène).
• HBeAg - antigène e, est localisée dans le noyau du virion et, contrairement à HBcAg, non seulement est présent dans le virion, mais aussi circule dans le sang sous une forme libre ou sous forme de complexe avec l'anti-HBe. Il est sécrété dans le sang à partir des hépatocytes avec une réplication active du VHB.

L'antigène de surface - HBsAg - existe sous la forme de trois variantes morphologiquement différentes: 1) représente le supercapside du virion entier; 2) en grande quantité se présente sous la forme de particules de 20 nm de diamètre, de forme sphérique; 3) sous la forme de filaments d'une longueur de 230 nm. Chimiquement, ils sont identiques. La composition a un antigène HBsAg totale et deux paires de déterminants spécifiques du type mutuellement exclusifs: d / y et w / r, donc il y a quatre grands sous-type HBsAg (et donc HBV): adw, adr, ayw et aur. Antigène a fournit la formation d'une immunité croisée commune à tous les sous-types du virus.

En fait, le virion, la particule de Dain, a une forme sphérique et un diamètre de 42 nm. La supercapside du virion est constituée de trois protéines: la principale (principale), la grande et la moyenne. Le génome est enfermé dans une capside et est représenté par un ADN annulaire double brin d'une masse de 1,6 MD. L'ADN se compose d'environ 3200 nucléotides, mais son "plus" -non est de 20 à 50% plus court que le signe moins. Avec l'extrémité 5 'du long filament, la protéine spécifique du virus est liée de manière covalente. Les extrémités 5 'des deux brins sont complémentaires et forment des séquences "collantes" de 300 nucléotides de longueur, de sorte que les filaments sont fermés dans le cycle. La teneur en G + C dans l'ADN du virion est de 48-49% molaire. Dans le noyau du virion, il y a en plus de l'ADN génomique ADN-ADN polymérase ADN-dépendante. L'ADN "minus" -define de HBV ne contient que quatre gènes (S, C, P et X), mais ils sont organisés de manière très compacte. Les gènes S, C, P, X se chevauchent fortement et contrôlent la synthèse des produits suivants. Le gène S code pour la synthèse de la protéine de l'enveloppe principale et contient toutes les informations sur l'antigène de surface de HBsAg. En outre, il code pour la synthèse de protéines d'enveloppe moyennes et grandes. Les protéines contiennent une extrémité COOH commune, mais leur traduction commence avec trois codons initiateurs différents. Le gène C code pour la synthèse des protéines de la capside (HBcAg et HBeAg); Bien que ces protéines soient codées par un seul gène, les voies de leur traduction sont différentes. Le gène P est le plus grand. Il comprend une partie des trois autres gènes et code les enzymes nécessaires à la réplication du virus. En particulier, il code pour la transcriptase inverse, le domaine de l'enzyme ARN-ase H, la protéine 5'-terminale de la chaîne "moins". Le gène X code pour des protéines qui régulent l'expression (expression) de tous les gènes viraux, en particulier une protéine d'une masse de 17 kD, qui est un transactivateur de transcription génique.

Les protéines qui forment un antigène de surface existent sous forme glycosylée (gp) et non glycosylée. Les glycosylés sont gp27, gp33, gp36 et gp42 (les nombres sont indiqués par m en kD). Le Supercapsid HBV est constitué de la protéine S principale ou basique (92%); protéine moyenne M (4%) et grande ou longue protéine L (1%).

• La protéine principale, p24 / gp27, ou la protéine principale (protéine S), est le composant principal de l'enveloppe du VHB. En l'absence d'autres protéines de la coquille, il polymérise et forme des particules sphériques d'un diamètre de 20 nm, constituées de 100 molécules polypeptidiques.
• Une grande protéine, p39 / gp42, ou une protéine longue (protéine L), est présente dans les trois formes de HBsAg. Il joue un rôle important dans la morphogenèse des virions et dans leur sortie de la cellule. L-protéine contient la séquence de la protéine M, qui est complétée par des séquences N-terminales de la 108 (ayw) ou 119 (adw, adr, ayr) les résidus d'acides aminés codée région NPE-Sl-S-gène.
• La protéine moyenne - gp33 / gp36, ou la protéine M, est également présente dans les trois formes morphologiques de HBsAg. La protéine M contient, à l'extrémité N-terminale, une région de 55 résidus d'acides aminés codés par la région pré-52 du gène S. Il est supposé que ce site joue un rôle important dans la reconnaissance du virus de l'hépatite B par les cellules hépatiques d'une gamme limitée d'hôtes (humain, singe chimpanzé). Les séquences protéiques codées par les régions S-gène npe-S ont une immunogénicité élevée, et leurs déterminants sont situés sur la surface du virion. Par conséquent, les anticorps dirigés contre ces antigènes jouent un rôle important dans la formation de l'immunité contre l'hépatite B.

La synthèse des protéines virales est étroitement contrôlée au niveau de la transcription et de la traduction. Dans la transcription du génome viral, deux types d'ARNm sont synthétisés:

• un plus petit - 2100 nucléotides - code les protéines principales et moyennes de la membrane;
• large - 3 500 nucleotides, c'est-à-dire plus long que l'ADN génomique lui-même; il contient des répétitions terminales de 100 nucléotides de longueur.

Ce type d'ARNm code pour la protéine de capside et les produits du gène P. C'est aussi un modèle pour la réplication de l'ADN viral. En tant que partie du génome, il existe des activateurs (activateurs de la transcription) - des éléments régulateurs qui activent l'expression de tous les gènes viraux et agissent principalement dans les cellules hépatiques. En particulier, le gène S est exprimé à un très haut niveau uniquement dans les cellules hépatiques et sous l'influence des hormones stéroïdiennes. Cette circonstance explique pourquoi l'hépatite B chronique et le cancer du foie (hépatome) sont observés chez les hommes plus souvent que chez les femmes qui ont un taux plus faible d'hormones stéroïdiennes.

D'autres éléments régulateurs du virus de l'hépatite B modulent (contrôlent) les taux de synthèse des protéines individuelles. Par exemple, une grande protéine est synthétisée seulement en petites quantités. La plupart à la surface des virions infectieux. Et la protéine principale et, dans une moindre mesure, la protéine moyenne sont synthétisées en quantités énormes et laissent les cellules dans les particules d'antigène de surface, qui dans le sérum contiennent beaucoup plus de fois que les virions matures. Le nombre de particules d'antigène de surface peut être de 1011-1013 pour 1 ml de sang (plusieurs centaines de μg).

Le virus de l'hépatite B est isolé dans une nouvelle famille de virus - Hepadnaviridae, genre Orthohepadnavirus. Des hépadnavirus similaires ont été trouvés chez divers animaux (protéines de la terre, marmottes, tamias, canards de Pékin).

La reproduction des hépadnavirus se déroule de manière inhabituelle. En particulier, la réplication de l'ADN génomique se produit à travers le lien intermédiaire - ARN, c'est-à-dire avec le mécanisme de la transcription inverse.

Le cycle de vie du virus de l'hépatite B.

• Adsorption sur la cellule.
• La pénétration dans la cellule par endocytose mécanisme à médiation par le récepteur (fosse bordée -> flacon bordé -> lysosome -> sortie de nucléocapside et l'entrée du génome viral dans le noyau des hépatocytes).
• Reproduction intracellulaire

Lors de la pénétration dans la cellule, la chaîne d'ADN courte ("plus") s'allonge (complète). Dans le noyau, l'ARN polymérase ADN-dépendante synthétise un ARN de 3500 nucléotides (pré-gènes) et des ARNm plus petits pour la synthèse de protéines virales. Ensuite, le prégène et l'ADN polymérase virale sont emballés dans une capside nouvellement synthétisée, qui est transférée dans le cytoplasme. Ici, la transcription inverse du pré-génome se produit. Il synthétise un nouvel ADN "minus" -define. Après achèvement de la synthèse de l'ADN négatif, l'ARN pré-génomique est détruit. L'ADN polymérase du virion sur la chaîne "moins" synthétise une chaîne "plus". L'ADN viral, maintenant double-brin, peut exister dans la cellule pendant assez longtemps et retourner au noyau pour le cycle de réplication suivant. Si la nouvelle particule virale ne soit pas soumis à la réplication plus, la nucléocapside formée par le passage à travers la membrane cellulaire, recouverte superkapsidom, bourgeon de la cellule, et il est immédiatement arrêté court extension du « plus » -chaîne ADN. C'est pourquoi la longueur de ce fil varie. Dans une forme aiguë typique des marqueurs sérologiques de l'hépatite B qui suivent séquentiellement apparaître dans le sang: HBsAg, HBeAg et des anticorps (IgM, IgG): anti-HBcAg. Anti-HBeAg et anti-HBsAg.

La composition du virus de l'hépatite B ont oncogène, mais a constaté que, en pénétrant dans le chromosome cellulaire (dans ses différentes sections), l'ADN viral peut être induite dans les différents ajustement génétique - deletion, translocation, une amplification, qui peut provoquer le développement d'un cancer du foie - une des conséquences les plus graves de l'hépatite virale B.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8],

Résistance du virus de l'hépatite B

Le virus de l'hépatite B est très résistant. À température ambiante, il reste viable pendant 3 mois, à l'état congelé - pendant plusieurs années. Le virus est complètement inactivée par autoclavage (120 ° C) au reflux pendant 30 min, avec de la chaleur sèche à une température de 180 « C pendant 60 min, à 60 ° C -. Pendant 10 heures résistants en milieu acide, mais est détruit dans un alcalin. Le virus meurt lorsqu'il est traité avec du H202, de la chloramine, du formol, du phénol et avec une irradiation UV.

Pathogenèse et symptômes de l'hépatite B

Le virus est injecté par voie hématogène directement dans le foie. Dans la pathogenèse de l'hépatite, les réponses humorales et cellulaires auto-immunes jouent un rôle important. On suppose que la perte hépatocytaire due non pas tant à l'action directe du virus lui-même, mais avec les réactions immunologiques hôtes qui se produisent dans le cadre de la modification de la membrane cellulaire des protéines virales qui induisent l'apparition d'auto-anticorps aux cellules du foie. Par conséquent, le développement d'une hépatite chronique et d'une cirrhose du foie peut être considéré comme une maladie auto-immune.

Les réactions auto-immunes cellulaires aux protéines virales contenues dans la membrane hépatocytaire sont médiées par les lymphocytes T cytotoxiques et d'autres cellules tueuses hépatiques. Par conséquent, une dystrophie aiguë du foie peut être considérée comme une réaction de rejet d'un hétérogreffe particulier.

La période d'incubation dure de 45 à 180 jours, en moyenne de 60 à 90 jours. L'évolution clinique de l'hépatite B est caractérisée par une grande diversité; la maladie peut survenir: sous une forme latente, détectée seulement par des méthodes de laboratoire, sous une forme ictérique typique et sous une forme maligne qui se termine létale. La durée de la phase pré-jaunissement varie d'un jour à plusieurs semaines. Icteric période est généralement long et se caractérise par des symptômes bien définis (ictère, hyperbilirubinémie, urine foncée, ictère sclérotique). Forme est observée dans prolongée 15-20% des patients et 90% d'entre eux développent une hépatite chronique B. Les patients présentant des formes chroniques processus auto-immuns fréquemment observés sont accompagnés d'une teneur élevée en anticorps protivopechenochnyh qui sont détectés par immuno-enzymatique (IPM). Chez les enfants, l'hépatite B est légère et souvent sans jaunisse, chez les jeunes enfants - la plupart du temps asymptomatiques.

L'immunité post-infectieuse (humorale et cellulaire) est longue, permanente, due aux anticorps neutralisant le virus (anti-HBsAg) en l'absence d'antigène de surface dans le sang. Souvent observé une immunisation latente due à un contact répété avec le VHB, qui est la cause de l'immunité généralisée au virus parmi la population. Habituellement, les patients atteints de forme aiguë de l'hépatite B se rétablissent complètement au fur et à mesure que les anticorps s'accumulent. Cependant, dans certains cas, malgré le taux élevé d'antigène viral dans le sang (une circonstance expliquant pourquoi l'infection parentérale se produit le plus souvent), les anticorps ne sont pas produits. Le virus reste dans le foie, et une personne pendant une longue période, parfois à vie, devient un porteur chronique. Cette circonstance est évidemment liée à une réponse immunitaire faible. L'un des résultats les plus courants de l'hépatite B chronique est la cirrhose et le cancer du foie, qui se développe après une période de latence allant jusqu'à 30-50 ans.

Epidémiologie de l'hépatite B

La source de l'infection par le virus de l'hépatite B est seulement une personne. Contrairement aux représentations précédentes que l'infection par le virus de l'hépatite B se produit exclusivement par voie parentérale, est maintenant prouvé qu'il se trouve dans diverses sécrétions et excrétions :. Salive, les sécrétions naso-pharyngées, les matières fécales, le liquide lacrymal, le sperme, le sang menstruel, etc. Ainsi, l'infection se produit non seulement par la voie parentérale, mais aussi sexuelle et verticale (de la mère au fœtus), t. E. Pratiquement l'infection par le virus de l'hépatite B peut à bien des égards.

L'hépatite B dans le monde a tué autant de personnes que pendant toutes les années de la Seconde Guerre mondiale. Selon l'OMS, le nombre de porteurs du virus de l'hépatite B varie de 0,1 à 20% de la population de différents pays ou régions.

[9], [10], [11], [12], [13], [14], [15], [16],

Diagnostic de l'hépatite B

Actuellement, la principale méthode de diagnostic de l'hépatite B est l'utilisation d'une réaction d'hémagglutination passive inverse (ROSGA) pour détecter un virus ou son antigène de surface, l'HBsAg. Comme déjà noté, le sang de l'antigène de surface contient plusieurs fois plus que le virus lui-même (100-1000 fois). Pour la réaction de ROPGA, les érythrocytes sont sensibilisés avec des anticorps contre le virus de l'hépatite B. S'il y a un antigène dans le sang, une réaction d'hémagglutination se produit. ROPGA est simple, pratique, très spécifique. Pour détecter les anticorps dirigés contre l'antigène du virus HBsAg, différentes méthodes immunologiques (DSC, RPGA, IFM, RIM, etc.) sont utilisées. De plus, des variants PCR sont utilisés pour détecter le VHB et ses antigènes.

Diverses méthodes immunologiques peuvent être utilisés pour détecter des anticorps dans le sérum du patient à un antigène viral (HBsAg) (RSK, TPHA, une réaction de précipitine, IPM, etc. HLR.).

[17], [18], [19], [20], [21], [22],

Prévention spécifique de l'hépatite B

Compte tenu de l'incidence élevée de l'hépatite B et de l'existence de nombreux porteurs du VHB dans le monde, les vaccinations de l'OMS contre l'hépatite B sont obligatoires et doivent être effectuées au cours de la première année de vie. Deux types de vaccins sont recommandés pour la vaccination. Pour préparer l'un d'eux, le plasma des porteurs de virus est utilisé comme matière première, puisque l'antigène viral contenu dans celui-ci est contenu en quantité suffisante pour préparer le vaccin. La condition principale pour la préparation de ce type de vaccin est leur sécurité totale, c'est-à-dire l'inactivation complète du virus, qui est fournie par la technologie de préparation du vaccin. Pour fabriquer un vaccin d'un type différent, des méthodes de génie génétique sont utilisées, en particulier, un clone recombinant de levure qui produit l'antigène de surface du virus de l'hépatite B est utilisé pour préparer le matériel antigénique.

Les deux vaccins sont très efficaces (protéger 95% des vaccinés). La durée de l'immunité post-vaccinale n'est pas inférieure à 5-6 ans. Des vaccins ont été créés pour les adultes et les nourrissons et les jeunes enfants - l'élément le plus important de la lutte mondiale contre l'hépatite B. Le cycle complet de la vaccination consiste en trois injections:

Je dose - immédiatement après la naissance; Dose II - après 1-2 mois; III dose - jusqu'à la fin de la première année de vie.

Ces vaccins inclus dans le programme élargi de vaccination, l'OMS et aligné avec le calendrier de sa mise en œuvre (selon les recommandations de l'OMS sur la 1ère année de la vie est effectuée la vaccination contre la tuberculose, la poliomyélite, l'hépatite B, la rougeole, le tétanos, la diphtérie, la coqueluche).

La gammaglobuline, qui contient des anticorps contre le VHB, est utilisée pour l'immunoprophylaxie passive d'urgence chez les personnes ayant été en contact avec un patient atteint de l'hépatite B.

Pour traiter l'hépatite B (formes aiguës et chroniques), utiliser l'interféron et l'amixine (pour l'induction de sa synthèse endogène). Dans le traitement de l'hépatite B chronique, un nouveau médicament lamivudine (nucléoside synthétique) est efficace.