Salmonella - agents pathogènes de la typhoïde et de la paratyphoïde

La fièvre typhoïde est une maladie infectieuse aiguë grave caractérisée par une intoxication générale profonde, une bactériémie et des lésions spécifiques de l'appareil lymphatique de l'intestin grêle. L'intoxication se manifeste par de violents maux de tête, confusion, délire (typhus du typhos grec - brouillard). La fièvre typhoïde comme une unité indépendante nosologique pour la première fois tenté d'isoler médecin russe AG Pyatnitskii retour en 1804, mais a finalement fait en 1822 R. Breton, qui différencie cette maladie de la tuberculose intestinale et suggère la nature contagieuse de la fièvre typhoïde.

L'agent causal de la fièvre typhoïde - Salmonella typhi - a été découvert en 1880 par K. Ebert et isolé en culture pure en 1884 par K. Gaffki. Peu de temps ont été isolées et étudiées pathogènes paratyphoïde A et B - S. Paratyphi A et S. Paratyphi B. Genre Salmonella comprend un grand nombre de bactéries, mais seulement trois d'entre eux - S. Typhi, S. Paratyphi A et S. Paratyphi B - causer la maladie chez une personne avec un tableau clinique de la fièvre typhoïde. Morphologiquement, ils sont indiscernables: bâtonnets gram-négatifs courts avec des extrémités arrondies, 1-3,5 microns de long, 0,5-0,8 microns de diamètre; les spores et les capsules ne se forment pas, ont une mobilité active (peritrichi). La teneur en G + C dans l'ADN est de 50-52 mol%.

Les agents responsables de la typhoïde et de la paratyphoïde sont des anaérobies facultatifs, une température optimale pour la croissance de 37 ° C (mais qui peut croître de l'ordre de 10 à 41 ° C), pH 6,8-7,2; ne sont pas exigeants pour les milieux nutritifs. La croissance sur le bouillon est accompagnée de la turbidité, sur le MPA, des colonies rondes tendres, lisses, translucides avec un diamètre de 2-4 mm sont formés. Cependant, les colonies de S. Typhi ayant un antigène Vi sont troubles. Colonies S. Paratyphi En plus grossiers, après quelques jours, ils forment le long de leur périphérie des rouleaux particuliers. Dans les environnements Endomo, les colonies des trois salmonelles sont incolores, sur le bismuth-sulfitagar-noir. Dans le cas d'une dissociation sur milieu dense, les colonies de forme R se développent. L'environnement sélectif des agents responsables de la fièvre typhoïde et de la paratyphoïde est le bouillon biliaire ou biliaire.

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Propriétés biochimiques des pathogènes de la typhoïde et de la paratyphoïde

Typhoïde et paratyphoïde PAthOGèNES POSSIBLES donnent une réaction positive avec MR, ne forme pas indole pas de gélatine liquéfié, nitrates réduits en nitrites, ne forment pas acétoïne. S. Typhi ne pousse pas sur de l'agar affamé avec du citrate. Les principales différences biochimiques entre les agents pathogènes typhoïde et paratyphoïde ont conclu que S. Typhi du glucose de ferments et d'autres hydrates de carbone pour former seulement l'acide, un S. Paratyphi A et S. Paratyphi B - et pour former l'acide et de gaz.

S. Typhi sur l'aptitude à fermenter le xylose et l'arabinose sont divisés en quatre types biochimiques: I, II, III, IV.

Xylose + - + -

Arabinose - - + +

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Structure antigénique des pathogènes de la typhoïde et de la paratyphoïde

Les salmonelles ont des antigènes O et H. Sur les antigènes O, ils sont divisés en un grand nombre de sérogroupes et, selon les antigènes H, en sérotypes (pour plus de détails sur la classification sérologique des salmonelles, voir la section suivante). S. Typhi, S. Paratyphi A et S. Paratyphi B diffèrent les uns des autres en termes d'antigènes O (appartenant à différents sérogroupes) et d'antigènes H.

En 1934, A. Felix et R. Pitt ont établi que S. Typhi, en plus des antigènes O et H, avait un autre antigène de surface, qu'ils ont appelé l'antigène de virulence (antigène Vi). Selon la nature chimique de l'antigène Vi-est différent de O et des antigènes H se compose de trois fractions différentes, mais la base est la N-polymère acide atsetilgalaktozaminouronovaya complexe avec m. M. 10 MD. L'antigène Vi se trouve habituellement dans des cultures fraîchement isolées, mais il est facilement perdu sous l'influence de divers facteurs (en particulier lorsqu'il est cultivé à des températures supérieures à 40 ° C et inférieures à 20 ° C, dans des milieux contenant de l'acide carbolique, etc.) au long stockage des cultures, est détruit à la température 100 ° С pendant 10 minutes. Comme il se trouve plus superficielle que l'antigène O, sa présence empêche la culture de S. Typhi agglutination du sérum de O-spécifique, donc une culture nécessairement vérifiée dans agglutination avec Vi-sérum. Au contraire, la perte de l'antigène Vi conduit à la libération d'O-antigène et à la restauration de l'O-agglutination, mais l'agglutination Vi est perdue. La teneur quantitative de l'antigène Vi chez S. Typhi peut varier considérablement, c'est pourquoi F. Kauffmann a proposé de classer S. Typhi en fonction de la teneur en antigène Vi en trois groupes:

• formes v-pure (allemand viel - many);
• formes w-pure (allemand wenig - peu);
• formes vw intermédiaires.

Trois mutants inhabituels de S. Typhi ont été trouvés: Vi-I-R-forme, les cellules manquent d'antigènes H et O, mais ils conservent de façon persistante l'antigène Vi; O-901 - dépourvu d'antigènes H et Vi; H-901 - contient des antigènes O et H, mais est dépourvu d'antigène Vi. Les trois antigènes: O-, H- et Vi- ont des propriétés immunogènes prononcées. La présence d'antigènes Vi permet de typer les cultures de S. Typhi. Il y a 2 types de phages qui ne lysent que les cultures qui contiennent l'antigène Vi: Vi-I est le phage universel, lyse la plupart des cultures de S. Typhi contenant Vi; et un ensemble de phages Vi-II lysant sélectivement la culture de S. Typhi. Cela a été montré en 1938 par J. Craig et K. Ian. Avec l'aide de Vi-phages de type II, ils ont divisé S. Typhi en 11 types de phages. En 1987, 106 types différents de S. Typhi de type Vi-phage avaient été identifiés. Leur sensibilité aux phages correspondants est un signe stable, donc le phagotyping a une signification épidémiologique importante.

Les schémas de phagotyping de S. Paratyphi A et S. Paratyphi B ont également été développés, selon lesquels ils sont divisés en douzaines de phagotypes. Il est significatif que les salmonella phagotypes ne puissent pas différer les uns des autres d'une autre manière.

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Résistance des pathogènes de la typhoïde et de la paratyphoïde

Les agents responsables de la typhoïde et de la paratyphoïde dans l'environnement externe (eau, sol, poussière) persistent, selon les conditions, de plusieurs jours à plusieurs mois. L'eau qui coule peut survivre jusqu'à 10 jours, congestive - jusqu'à 4 semaines sur les légumes et les fruits -. 5-10 jours sur la vaisselle - jusqu'à 2 semaines, dans le beurre, le fromage -. 3 mois, sur la glace - jusqu'à 3 mois . Et plus encore le chauffage à une température de 60 ° C tue en 30 minutes, et l'ébullition - instantanément. Les désinfectants chimiques classiques les tuent en quelques minutes. La teneur en chlore actif dans l'eau du robinet à une dose de 0,5-1,0 mg / l ou l'ozonisation de l'eau assure une désinfection fiable à la fois de Salmonella et d'autres bactéries intestinales pathogènes.

Facteurs de pathogénicité des pathogènes de la typhoïde et de la paratyphoïde

La caractéristique biologique la plus importante des agents responsables de la fièvre typhoïde et de la paratyphoïde A et B est leur capacité à résister à la phagocytose et à se multiplier dans les cellules du système lymphoïde. Ils ne forment pas d'exotoxines. Le facteur principal de leur pathogénicité, en plus de l'antigène Vi, est l'endotoxine, caractérisée par une toxicité inhabituellement élevée. De tels facteurs de pathogénicité tels que la fibrinolysine, la plasmocoagulase, la hyaluronidase, la lécithinase, etc., se retrouvent très rarement dans les pathogènes des infections typhoïdes et paratyphoïdes. La fréquence la plus élevée se trouve dans l'ADN-ase (75-85% des cultures étudiées de S. Typhi et S. Paratyphi B). Il a été établi que les souches de S. Typhi ayant un plasmide avec 6 mM sont plus virulentes. Par conséquent, la question des facteurs de pathogénicité de ces salmonelles reste à étudier.

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Immunité post-infectieuse

Les maladies persistantes, prolongées et répétées de la typhoïde et de la paratyphoïde sont rares. L'immunité est provoquée par l'apparition d'anticorps dirigés contre les antigènes V, O et H, les cellules de mémoire immunitaire et l'activité accrue des phagocytes. L'immunité post-vaccinale, contrairement à la post-infection, est de courte durée (environ 12 mois).

Épidémiologie de la typhoïde et de la paratyphoïde

La source de fièvre typhoïde et de paratyphoïde A est seulement une personne, un malade ou un porteur. La source de paratyphoïde B, en plus des humains, peut être des animaux, y compris des oiseaux. Le mécanisme de l'infection est fécale-orale. La dose infectieuse de S. Typhi de 105 cellules (provoque une maladie de 50% des volontaires), infectant des doses de salmonelles de paratyphoïdes A et B est beaucoup plus élevée. L'infection se produit principalement par contact direct ou indirect, ainsi que par l'eau ou la nourriture, en particulier le lait. Les plus grandes épidémies ont provoqué une infection par des agents pathogènes (épidémies d'eau).

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Les symptômes de la typhoïde et paratyphoïde

La période d'incubation de la fièvre typhoïde est de 15 jours, mais elle peut varier de 7 à 25 jours. Cela dépend de la dose infectante, de la virulence du pathogène et du statut immunitaire du patient. La pathogénie et le tableau clinique de la fièvre typhoïde et de la paratyphoïde A et B sont très similaires. Dans le développement de la maladie, les étapes suivantes sont clairement révélées:

• stade d'invasion. L'agent causal pénètre par la bouche dans l'intestin grêle;
• par les voies lymphatiques Salmonella entrer dans les formations lymphoïdes sous-muqueuse de l'intestin (plaques de Peyer et les follicules solitaires) et de les reproduire, la cause lymphangite et lymphadénite (granulés abdomino-typhoïde d'origine);
• bactériémie - la sortie de l'agent pathogène en grandes quantités dans le sang. Le stade de la bactériémie commence à la fin de la période d'incubation et peut (en l'absence de traitement efficace) se poursuivre tout au long de la maladie;
• le stade d'intoxication se produit en raison de la désintégration des bactéries sous l'action des propriétés bactéricides du sang et de la libération d'endotoxines;
• stade de la diffusion parenchymateuse. Du sang, la salmonelle est absorbée par les macrophages de la moelle osseuse, de la rate, des ganglions lymphatiques, du foie et d'autres organes. Un grand nombre d'agent causal de la fièvre typhoïde accumule dans les voies biliaires de la vésicule biliaire et le foie, où il trouve des conditions favorables à leur reproduction, et où les propriétés bactéricides de sang affaibli l'influence de la bile;
• stade excréteur-allergique. Comme la formation de l'immunité commence le processus de libération de l'agent pathogène. Ce processus est effectué par toutes les glandes: salivaire, intestins, sueur, produits laitiers (pendant l'alimentation du bébé), système urinaire et surtout activement - le foie et la vésicule biliaire. Isolé de la vésicule biliaire, Salmonella pénètre à nouveau dans l'intestin grêle, dont une partie est excrétée par les excréments, et certains envahissent à nouveau les ganglions lymphatiques. L'introduction secondaire dans les ganglions déjà sensibilisés entraîne chez eux une réaction hyperergique qui se manifeste par la nécrose et la formation d'ulcères. Cette étape est dangereuse par la possibilité de perforation de la paroi intestinale (ulcères), saignements internes et le développement de péritonite;
• stade de récupération. Le processus de guérison des ulcères se produit sans l'apparition de cicatrices défigurantes sur le sol, débarrassées des raids nécrotiques.

À son tour, dans le tableau clinique de la maladie, les périodes suivantes sont distinguées:

• I stade initial - stade incrementi (1ère semaine): une augmentation progressive de la température à 40-42 ° C, une augmentation de l'intoxication et d'autres manifestations de la maladie.
• II - le stade de développement maximal de tous les symptômes - stade acme (2-3 semaines de maladie): la température est maintenue à un niveau élevé;
• III - le stade de récession de la maladie - le quatrième decrementi (4ème semaine de la maladie): une diminution progressive de la température et une diminution de la manifestation d'autres symptômes;
• IV - stade de récupération.

Maladie 8-9 jours, et parfois plus tard, de nombreux patients semblent éruption roseolous sur la peau de l'abdomen, la poitrine et le dos. Rash (petites taches rouges) est une conséquence des processus de production et inflammatoires locaux de nature allergique dans les couches superficielles de la peau autour des vaisseaux lymphatiques, qui contiennent l'agent pathogène abondant. La récupération clinique ne coïncide pas toujours avec bactériologique. Environ 5% des patients deviennent porteurs chroniques de salmonella typhus ou de paratyphoïde. Les raisons sous-jacentes à long terme (plus de 3 mois, et parfois des années) porteuses de Salmonella, restent peu claires. Une valeur connue dans le support de formation joué par l'inflammation locale dans la bile des voies (parfois urinaire) qui se posent souvent en relation avec la fièvre typhoïde, les infections ou paratyphoïde exacerbée à la suite de ces infections. Cependant, un rôle également important dans la formation de la typhoïde Salmonella porteuse longue et paratyphoïde A et B joue L-transformation d'entre eux. Salmonella en forme de L perdre H-, et partiellement 0-Vi-antigènes sont généralement situés intracellulairement (dans les macrophages de la moelle osseuse), et par conséquent ne sont pas disponibles pour une chimiothérapie ou des anticorps, et peut persister dans le corps malade depuis longtemps. Pour revenir à la forme originale et la récupération de tout son salmonelles structure antigénique redevenir virulents pénètrent à nouveau dans les voies biliaires, exacerber le processus de bactéries, sont excrétés avec les matières fécales et de sorte que le support est une source d'infection pour les autres. Il est également possible que la formation du transport bactérien dépende d'un certain déficit du système immunitaire.

Diagnostic en laboratoire de la typhoïde et de la paratyphoïde

La première et la plus simple méthode de diagnostic de la typhoïde et de la paratyphoïde est bactériologique, c'est-à-dire l'hémoculture ou la myéloculture. À cette fin, examiner le sang ou la moelle osseuse ponctuée. Sang mieux semer sur un milieu Rapoport (bouillon cholique additionné de glucose indicateur et flottent verre) dans un rapport de 1:10 (10 ml de milieu 1 ml de sang). Les semis doivent être incubés à 37 ° C pendant au moins 8 jours et en tenant compte de la présence éventuelle de formes L - jusqu'à 3-4 semaines. Pour l'identification des Salmonella cultures isolées sont utilisées (sur la base de leurs propriétés biochimiques) sérums adsorbés de diagnostic contenant des anticorps contre les antigènes 02 (S. Paratyphi A), 04 (S. Paratyphi B) et 09 (S. Typhi). Si la culture isolée de S. Typhi n'est pas agglutinée avec du sérum 09, elle doit être vérifiée avec du sérum Vi.

Pour isoler S. Typhi, il est possible d'utiliser de l'exsudat, obtenu en scarifiant des roséoles cultivant le roséol.

Une étude bactériologique des fèces, de l'urine et de la bile est réalisée pour confirmer le diagnostic, contrôler la récupération bactériologique à la sortie du convalescent et pour le diagnostic du transport bactérien. Dans ce cas, le matériau préalablement ensemencé dans un milieu d'enrichissement (produits chimiques contenant des médias tels que sélénite, qui inhibent la croissance de E. Coli et d'autres représentants de la flore intestinale, mais pas inhibé la croissance de Salmonella), puis avec le moyen d'enrichissement - pour moyen de diagnostic différentiel ( Endo, bismuth sulfitagar) afin d'isoler des colonies isolées et d'en obtenir des cultures pures identifiées par le schéma ci-dessus. Pour détecter O- et Vi-antigène dans le sérum et les selles de patients peuvent être utilisés avec un anticorps DGC TPHA Diagnosticum, la réaction koagglyutinatsii unité hémagglutination, IFM. Pour l'identification accélérée de S. Typhi, il est prometteur d'utiliser comme sonde un fragment d'ADN portant le gène Vi-antigène (temps d'identification 3-4 h).

Depuis la fin de la 1ère semaine de la maladie chez les patients ayant des anticorps sériques apparaissent donc, pour le diagnostic de la fièvre typhoïde en 1896, F. Vidal a proposé la réaction d'agglutination de tube à essai est déployé. La dynamique des anticorps dirigés contre S. Typhi est unique: les anticorps dirigés contre l'antigène O apparaissent d'abord, mais leur titre diminue rapidement après la récupération; H-anticorps apparaissent plus tard, mais ils persistent après la maladie et la vaccination pendant des années. Avec cela à l'esprit, la réaction est mis Vidal séparemment O- et N-diagnosticums (et aussi paratyphoïde diagnosticums A et B) pour éviter d'éventuelles erreurs dues à la vaccination ou la maladie précédemment transférés. Cependant, la spécificité de la réaction de Widal est pas suffisamment élevée, de sorte que l'application préférée TPHA tourné, dans lequel le Diagnosticum érythrocytes sensibilisés ou O- (O-anticorps de détection), ou Vi-antigène (pour la détection d'anticorps Vi). La plus fiable et spécifique est la dernière réaction (Vi-hémagglutination).

Le diagnostic de la contamination bactérienne de la typhoïde et de la paratyphoïde

La seule preuve est l'isolement des bactéries du milieu de culture de S. Typhi, S. Paratyphi A, S. Paratyphi C Le matériau à l'étude sont contenus duodénaux, les matières fécales et l'urine. La complexité du problème réside dans le fait que les transporteurs n'excrètent pas toujours avec ces substrats, il y a des pauses, et assez longues. En tant que procédés subsidiaires qui permettent plage étroite des personnes interrogées utilisent des tests sérologiques (détection simultanée O-, H-, Vi- ou O, les anticorps Vi indique la présence éventuelle de l'agent pathogène dans le corps) et le test allergique de la peau avec Vi-Tifina River. Ce dernier contient l'antigène Vi qui, lorsqu'il interagit avec les anticorps Vi, provoque une réaction allergique locale sous forme de rougeur et de gonflement pendant 20 à 30 minutes. Une réaction positive avec Vi-typhine indique la présence d'anticorps Vi dans le corps et la présence possible de S. Typhi. Pour identifier les formes L de S. Typhi, des anticorps immunofluorescents spéciaux sont proposés (aux antigènes de forme L du pathogène). V.Murom a proposé une méthode originale pour la détection des porteurs bactériens. Il consiste en l'étude des tampons, jetés simultanément dans les trappes d'égout dans tout le réseau d'égouts de la colonie.

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Traitement de la typhoïde et de la paratyphoïde

Le traitement de la fièvre typhoïde repose sur l'utilisation de divers antibiotiques, pour lesquels les agents pathogènes présentent une sensibilité élevée (lévomycétine, ampicilline, tétracyclines, etc.). Les antibiotiques réduisent la gravité de l'évolution de la maladie et raccourcissent sa durée. Cependant, le transfert de plasmides R à des salmonelles provenant d'E. Coli ou d'autres entérobactéries peut conduire à l'émergence de clones épidémiques dangereux parmi eux.

Prophylaxie spécifique de la typhoïde et de la paratyphoïde

Au lieu de sept vaccins antityphoïdiques différents, utilisés depuis 1978, un seul a été produit dans notre pays - un monovalent typhoïde abdominal à sorption chimique. Cependant, du fait que la fièvre typhoïde due aux épidémies est devenue sporadique (ce qui est devenu possible principalement grâce à l'amélioration des systèmes d'adduction d'eau et d'assainissement et à l'amélioration de la culture sanitaire), la vaccination de masse a disparu. Par conséquent, l' inoculation de la fièvre typhoïde n'est effectuée que dans le cas d'indications épidémiques.