Expert médical de l'article
Nouvelles publications
La réaction en chaîne de la polymérase (PCR) dans le diagnostic des maladies infectieuses
Dernière revue: 05.07.2025
Tout le contenu iLive fait l'objet d'un examen médical ou d'une vérification des faits pour assurer autant que possible l'exactitude factuelle.
Nous appliquons des directives strictes en matière d’approvisionnement et ne proposons que des liens vers des sites de médias réputés, des instituts de recherche universitaires et, dans la mesure du possible, des études évaluées par des pairs sur le plan médical. Notez que les nombres entre parenthèses ([1], [2], etc.) sont des liens cliquables vers ces études.
Si vous estimez qu'un contenu quelconque de notre contenu est inexact, obsolète ou discutable, veuillez le sélectionner et appuyer sur Ctrl + Entrée.
La PCR est une méthode de diagnostic de l'ADN qui permet de multiplier par millions le nombre de copies de la section détectée du génome (ADN) de bactéries ou de virus grâce à l'enzyme ADN polymérase. La section d'acide nucléique testée, spécifique d'un génome donné, est multipliée (amplifiée) plusieurs fois, ce qui permet son identification. Tout d'abord, la molécule d'ADN de la bactérie ou du virus est divisée en deux chaînes par chauffage. Ensuite, en présence d'amorces d'ADN synthétisées (la séquence nucléotidique est spécifique du génome à déterminer), elles se lient à des sections d'ADN complémentaires. La seconde chaîne d'acide nucléique est synthétisée après chaque amorce en présence d'ADN polymérase thermostable. Deux molécules d'ADN sont obtenues. Le processus est répété plusieurs fois. Une seule molécule d'ADN, c'est-à-dire une particule bactérienne ou virale, suffit au diagnostic. L'introduction d'une étape supplémentaire dans la réaction – la synthèse d'ADN sur une molécule d'ARN par l'enzyme transcriptase inverse – a permis de tester des virus à ARN, comme le VHC. La PCR est un processus en trois étapes qui se répète cycliquement: dénaturation, hybridation des amorces, synthèse d'ADN (polymérisation). La quantité d'ADN synthétisée est déterminée par ELISA ou électrophorèse.
La PCR peut utiliser divers matériaux biologiques - sérum sanguin ou plasma, grattage urétral, biopsie, liquide pleural, liquide céphalo-rachidien, etc. La PCR est principalement utilisée pour diagnostiquer des maladies infectieuses telles que l'hépatite virale B, l'hépatite virale C, l'hépatite virale D, l'infection à CMV, les infections sexuellement transmissibles (gonorrhée, chlamydia, mycoplasme, infections à ureaplasma), la tuberculose, l'infection par le VIH, etc.
L'avantage de la PCR dans le diagnostic des maladies infectieuses par rapport aux autres méthodes de recherche est le suivant:
- l'agent infectieux peut être détecté dans n'importe quel environnement biologique du corps, y compris le matériel obtenu lors d'une biopsie;
- il est possible de diagnostiquer les maladies infectieuses aux premiers stades de la maladie;
- il est possible d’évaluer quantitativement les résultats de la recherche (combien de virus ou de bactéries sont contenus dans le matériel étudié);
- haute sensibilité de la méthode; par exemple, la sensibilité de la PCR pour la détection de l'ADN du virus de l'hépatite B dans le sang est de 0,001 pg/ml (environ 4×10 2 copies/ml), tandis que la sensibilité de la méthode d'hybridation de l'ADN utilisant des sondes ramifiées est de 2,1 pg/ml (environ 7×10 5 copies/ml).
[