L'utilisation des technologies cellulaires pour améliorer l'apparence des cicatrices

La science moderne est caractérisée par le développement rapide d'un certain nombre de disciplines connexes, réunies sous le nom commun de «biotechnologie». Cette branche de la science, basée sur les dernières réalisations dans le domaine de la biologie, cytologie, génétique moléculaire, génie génétique, transplantantologii, vise à exploiter le potentiel énorme des cellules végétales et animales - l'unité structurelle de base de tous les êtres vivants. « Cellule vivante est prêt réacteur biotechnologique dans lequel sont mis en œuvre non seulement les processus qui conduisent à la formation du produit final, mais aussi un certain nombre d'autres systèmes facilitant le maintien de l'activité catalytique à un niveau élevé » - John Woodward, 1992. La science à partir de la cellule a été mise en 1665, lorsque le physicien anglais R. Hooke a créé le premier microscope et dans les cellules trouvées plug - cellulae ("cellules"). En 1829, M. Schleiden et T. Schwann justifient la «théorie cellulaire», qui prouve que tous les êtres vivants sont constitués de cellules. R.Virkhov en 1858 a prouvé, que dans la base de toutes les maladies s'enregistre la violation de l'organisation structurelle et le métabolisme des carreaux. Il est devenu le fondateur de la "pathologie cellulaire". La contribution fondamentale à la science de la cellule a été faite en 1907-1911. R. Garrison et AA Maksimov, prouvant la possibilité de cultiver des cellules en dehors du corps. Leur travail a montré que pour la culture des cellules, les tissus animaux et les parties de plantes doivent être déconnectés mécaniquement en petits morceaux. Pour isoler les cellules, les tissus sont coupés avec un couteau tranchant ou un microtome en sections minces, d'environ 0,5-1,0 mm. La division physique des cellules s'appelle l'immobilisation. Les cellules isolées sont obtenues par dispersion enzymatique de morceaux de plantes ou de tissus. Après écrasement avec des ciseaux pointus, les morceaux sont traités avec de la trypsine ou de la collagénase pour obtenir une suspension - suspension de cellules individuelles ou de leurs microagrégats dans un milieu spécial. Les gels d'alginate (alginate de calcium) sont largement utilisés pour immobiliser les cellules végétales. Il est prouvé que les cellules végétales et animales immobilisées conservent la capacité de biosynthèse. Les produits de la biosynthèse cellulaire s'accumulent dans les cellules, leur expression se fait soit spontanément, soit à l'aide de substances spéciales qui favorisent la perméabilité accrue des membranes cellulaires.

Culture de cellules animales - un processus beaucoup plus complexe que la culture de cellules végétales, ce qui nécessite un équipement spécial de la technologie moderne, haute, la disponibilité des différents médias, facteurs de croissance, visant à préserver la viabilité des cellules et les maintenir dans un état d'activité fonctionnelle élevée. Il a été constaté que la plupart des cellules des tissus durs, tels que les reins, le foie et les tissus cutanés dépendent de la surface, donc in vitro, elles ne peuvent être cultivées que sous forme de couches minces ou de monocouches fixées directement à la surface du substrat. La longévité, la prolifération et la stabilité fonctionnelle des cellules obtenues par dispersion enzymatique des tissus dépendent dans une large mesure du substrat sur lequel elles sont cultivées. Il est connu que toutes les cellules obtenues à partir de tissus de vertébrés ont une charge de surface négative, de sorte que des substrats chargés positivement sont appropriés pour leur immobilisation. Les cellules isolées obtenues directement à partir de tissus entiers peuvent être maintenues dans la culture primaire dans un état immobilisé tout en conservant une spécificité et une sensibilité élevées pendant 10 à 14 jours. Les cellules immobilisées, dépendantes de la surface jouent aujourd'hui un rôle important en biologie, en particulier leur rôle est important pour les études cliniques. Ils sont utilisés pour étudier les cycles de développement cellulaire, la régulation de leur croissance et de leur différenciation, les différences fonctionnelles et morphologiques entre les cellules normales et tumorales. Des monocouches de cellules immobilisées sont utilisées dans des biotests, pour la détermination quantitative de substances biologiquement actives, ainsi que pour l'étude des effets de diverses drogues et toxines sur celles-ci. Un grand intérêt pour la cellule, en tant que dispositif médical, a été démontré par des médecins de toutes spécialités depuis plusieurs décennies. Dans ce sens, les technologies cellulaires se développent rapidement.

Avec le début de la thérapie tissulaire et cellulaire, le nom du célèbre scientifique russe V.P. Filatov, qui en 1913 a jeté les bases pour l'enseignement de la thérapie tissulaire étude des greffes de cornée de donneurs sains aux patients atteints de la cataracte .. En fonctionnement, une greffe de cornée, il a constaté que les cornées conservés dans le froid pendant 1-3 jours à une température de -2 -4 degrés C devient meilleur que frais. Ainsi, il a été trouvé que la propriété des cellules sécrète dans des conditions défavorables certaines substances qui excitent les processus de la vie dans les tissus transplantés et se régénèrent dans les tissus du receveur. Le tissu et les cellules séparés du corps sont dans un état d'expérience, c'est-à-dire une vie ralentie. Chez eux, la circulation sanguine s'arrête, et par conséquent la nutrition. La respiration des tissus est extrêmement difficile, l'innervation et le trophique sont perturbés. Étant dans un nouvel état qualitatif, s'adaptant aux nouvelles conditions d'existence de la cellule, ils produisent des substances spéciales possédant des propriétés médicinales. Ces substances de nature non protéique ont été nommées par V.P. Filatov comme stimulants biogéniques. Il V.V.Skorodinskoy assemblons avec le matériel provenant d'animaux et de plantes peuvent être librement t autoclavé à 120 ° C pendant une heure après stockage dans des conditions défavorables, alors que non seulement ils ne perdent leur activité, mais au contraire elle a renforcé, en raison de rendement stimulants biologiques provenant de tissus en conserve. En outre, ils ont perdu des propriétés antigéniques, ce qui réduit considérablement la possibilité de rejet. La matière stérile en boîte a été injectée dans le corps par implantation (replantation) sous la peau ou sous la forme d'injections d'extraits, obtenant des résultats adéquats. Il a également été constaté que les tissus fœtaux contiennent significativement plus de substances biologiquement actives que les tissus adultes, et certains facteurs ne se trouvent que dans les embryons. Organisme receveur de tissus foetaux inoculées pas perçue comme étrangère à l'absence dans la composition des protéines de membrane cytoplasmiques responsables de l'espèce, des tissus, et de la spécificité individuelle (protéines, complexe majeur d'histocompatibilité). En conséquence, l'inoculation de tissus fœtaux humains dans le corps humain ne déclenche pas les mécanismes de défense immunologique et la réaction d'incompatibilité et de rejet. VP Filatov dans la pratique médicale largement utilisé le placenta humain et la peau. Les traitements consistaient en 30-45 injections d'extraits tissulaires et 1-2 implants de tissus autoclavés.

Ayant commencé la recherche sur les tissus et cellules humains et animaux, il a transféré ses généralisations au monde végétal. La production d'expériences sur les parties vivantes de plantes (aloès, plantain, agave, fanes de betteraves, et Saint-wort de John, etc.), il les a créés à des conditions défavorables en plaçant la coupe des feuilles dans un endroit sombre, comme pour la vie de la plante a besoin de lumière. De la tourbe boueuse et de la tourbe, on leur a aussi donné des stimulateurs biogéniques, en raison du fait que la boue et la tourbe sont formées avec la participation de la microflore et de la microfaune.

Un nouveau cycle de traitement des tissus de développement a reçu dans les années 70 en retard, quand les connaissances accumulées et des décennies d'expérience ont permis à un nouveau niveau entier à utiliser les tissus animaux et végétaux et des cellules pour le traitement humain et prolonger sa longévité active. Ainsi, dans certaines cliniques locales et un certain nombre de femmes étrangères dans la ménopause physiologique, la ménopause ou ovariectomie de fond pour ralentir le processus de vieillissement, le développement de l'athérosclérose, l'ostéoporose, le dysfonctionnement des systèmes immunitaire, endocrinien et nerveux a commencé à tenir les tissus du fœtus de thérapie tissulaire du placenta, hypothalamus, le foie, ovaires, le thymus et les glandes thyroïdes. Dans l'un des plus prestigieux des cliniques de Gerontius-cosmétiques en Europe occidentale pour le même but depuis des décennies en utilisant des injections d'extraits, dérivés de tissus fœtaux des glandes sexuelles des moutons.

Dans notre pays, le traitement biostimulant a également été largement utilisé. Les patients atteints de diverses maladies jusqu'à récemment activement reçu des injections d'extraits de placenta, aloès, kolanhoe, stonecrops grande taille (biosed), FIB peloidodistillyat, peloidin, TORFOT, gumizol préparés par procédure Filatov. Actuellement, dans les pharmacies, il est pratiquement impossible d'acheter ces préparations de tissus domestiques très efficaces et peu coûteux d'origine animale, végétale et minérale.

Sous-jacente obtenir diverses préparations nutritives à partir de tissus et organes importés humains, tels que Rumalon (à partir du tissu du cartilage et de moelle osseuse) aktovegin (à partir de sang de veau) solkoseril (bovins extrait de sang) et les médicaments domestiques - vitreux ( oeil bovin vitreux) de kerakol (à partir de la cornée de bovins), la splénine (à partir de la rate de bovins), epitalyamin (région de epitalyamo-épiphysaire) se trouvent également des recherches Filatov. La propriété commune pour toutes les préparations de tissus est l'effet global sur l'organisme entier. Ainsi, la « thérapie tissulaire » Académicien Filatov a été la base de la plupart des développements modernes et tendances en chirurgie, l'immunologie, l'obstétrique et ginekoloii, gérontologie, combustiology, dermatologie et cellulaire liés à la cosmétologie et les produits de sa biosynthèse.

Le problème de la transplantation de tissus inquiète l'humanité depuis l'Antiquité. Ainsi, dans le papyrus d'Ebers, daté de 8000 av. J.-C., il est déjà fait mention de l'utilisation de la transplantation tissulaire pour compenser les défauts de certaines parties du corps. Dans le "Livre de Vie" du savant indien Sushruta, qui a vécu 1000 litres. BC il y a une description détaillée de la restauration du nez de la peau des joues et du front.

Le besoin de peau de donneur a augmenté proportionnellement à l'augmentation du nombre de chirurgies plastiques et reconstructives. À cet égard, a commencé à utiliser la peau cadavérique et fœtale. Il était nécessaire de conserver les ressources des donneurs et de trouver des moyens de remplacer la peau humaine par des tissus animaux, diverses options de modélisation de la peau. Et il est dans ce domaine scientifiques travaillant alors qu'en 1941 P.Medovar d'abord montré la possibilité fondamentale de la croissance des kératinocytes in vitro. La prochaine étape importante dans le développement de la technologie cellulaire a été le travail de Karasek M. Et M. Charlton, qui en 1971 a réalisé la première transplantation réussie de kératinocytes autologues à partir d'une culture primaire des plaies de lapin, en utilisant comme substrat pour la culture de gel de collagène KC, améliorant ainsi la prolifération cellulaire dans la culture. J.Rheinvvald. H Vert. Ont développé une technologie pour la culture en série de grandes quantités de kératinocytes humains. En 1979, Vert et ses collègues ont découvert les perspectives d'application médicale de la culture de cellules kératinocytes dans la reconstruction de la peau avec des brûlures étendues, après quoi cette technique est en constante amélioration, il a commencé à être utilisé par les chirurgiens brûler les centres à l'étranger et dans notre pays.

Dans le processus d'étude des cellules vivantes ont révélé que les cellules produisent non seulement stimulateurs biogènes d'origine non protéique, mais aussi un certain nombre de cytokines, des neurotransmetteurs, des facteurs de croissance, des polypeptides, qui jouent un rôle important dans la régulation de l'homéostasie de l'organisme entier. Il a été trouvé que, dans diverses cellules et tissus, des biorégulateurs peptidiques sont contenus. Qui ont un large éventail d'effets biologiques et coordonnent le développement et le fonctionnement des systèmes multicellulaires. L'ère de l'application de la culture cellulaire en tant qu'agent thérapeutique a commencé. Dans notre suspension tansplantatsiyu pays de couches cellulaires et fibroblaste kératinocytaire stratifiés dans la dernière décennie, nous avons adopté en combustiology. Un tel intérêt actif dans la transplantation de cellules de peau brûlée en raison de la nécessité d'une fermeture rapide de grandes surfaces de brûlure et le déficit de la peau des donateurs. La possibilité d'un petit morceau de peau plus grande distinction des cellules qui peuvent couvrir la surface de la plaie en 1000 et même 10 000 fois supérieure à la surface de la peau des donateurs était très attrayant et important pour Combustiology et brûler les patients. Le pourcentage de couches de kératinocytes varie la prise de greffe en fonction de la zone de combustion, l'âge et l'état de santé du patient 71,5 à 93,6%. L'intérêt pour la transplantation de kératinocytes et des fibroblastes associés non seulement la possibilité de fermer rapidement le défaut de la peau, mais aussi au fait que ces transplantations ont un potentiel bioactif puissant pour améliorer l'apparence des tissus provenant de greffes. Néoplasme des vaisseaux sanguins, l'élimination de l'hypoxie, l'amélioration de la trophicité, accéléré la maturation des tissus immatures - cette base morpho-fonctionnelle de ces changements positifs qui ont lieu en raison de la libération des cellules transplantées, des facteurs de croissance et cytokines. Ainsi, grâce à l'introduction dans la pratique clinique des couches multicellulaires de transplantation de technologies cellulaires avancées de kératinocytes autologues et allogéniques et des fibroblastes sur de vastes surfaces de la plaie, Combustiology ont eu l'occasion non seulement de réduire le taux de mortalité tiré avec un grand pourcentage de lésions cutanées, mais aussi d'améliorer le tissu cicatriciel de la qualité, ce qui a inévitablement se produit sur le site des brûlures IIb et IIIa et 6 degrés. Expérience combustiologists obtenus dans le traitement des surfaces des plaies chez les patients brûlés ont suggéré l'idée d'utiliser est déjà une méthode de Green modifiée en dermatologie et la pratique chirurgicale dans divers peau et pathologie cosmétique (ulcères trophiques, vitiligo, naevus, épidermolyse bulleuse, enlever les tatouages, les changements de la peau liés à l'âge, ainsi que pour améliorer l'apparence des cicatrices).

L'utilisation de kératinocytes allogéniques en chirurgie, la dermatologie et combustiology a plusieurs avantages sur kératinocytes autologues primeneiya comme matériau cellulaire peut être préparé à l'avance en quantités illimitées, préserver et d'utiliser en cas de besoin. Il est également connu que les KC allogéniques ont une activité antigénique réduite, puisque les cellules de Langerhans, porteurs d'antigènes du complexe HLA, sont perdues in vitro. En faveur de l'utilisation de KC allogénique dit aussi qu'ils sont remplacés par autologue après la transplantation, selon les auteurs de la période de 10 jours à 3 mois. Dans ce contexte, des banques de cellules ont été créées dans de nombreux pays, grâce auxquelles les greffes de cellules peuvent être produites en quantité et au bon moment. Ces banques sont en Allemagne, aux États-Unis, au Japon.

L'intérêt pour l'utilisation des technologies cellulaires en dermatologie et cosmétologie en raison du fait que « la composition cellulaire » portent un fort potentiel bioénergétique et d'information, grâce auquel est possible d'obtenir un traitement de résultats qualitativement nouveaux. Autokiny (facteurs de croissance, cytokines, l'oxyde nitrique, et d'autres.) Les cellules transplantées allouées agissent principalement sur leurs propres fibroblastes, augmentant leur activité synthétique et proliférante. Ce fait est particulièrement intéressant pour les chercheurs, puisque les fibroblastes sont la cellule clé du derme, dont l'état fonctionnel dépend de l'état de toutes les couches de la peau. Il est également connu que, après Cauter des blessures de la peau, le laser, l'aiguille et d'autres outils, à partir de la moelle osseuse, le tissu adipeux et péricytes capillaire est réapprovisionné avec des précurseurs de souches de peau fraîche fibroblaste qui favorise la piscine « rajeunissement » propres cellules. Ils commencent activement à la synthèse de collagène, d'élastine, des enzymes, des glycosaminoglycanes, des facteurs de croissance et d'autres molécules biologiquement actives, ce qui conduit à augmenter l'hydratation et la vascularisation du derme, ce qui améliore sa résistance,